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詳細介紹酶標儀酶免分析七大步驟
更新時間：2016-04-27 點擊次數：2263次
酶標儀是酶聯免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。 測定一般要求測試液的終體積在250μL以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。
1 、將標準品和樣品對應的微孔編號，每個標準品和樣品做雙孔平行，并記錄標準品和樣品的位置。
2 、在標準品孔中加入 50µl 各標準品溶液，酶標儀在各樣品孔中加入 50µl 樣品溶液。
3 、在所有孔中加入 50µl 的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻， 25 ℃環境中避光反應 30 分鐘。
4 、小心揭開蓋板膜，甩干孔中液體，用稀釋好的洗滌液（ 250μl/ 孔）充分洗滌微孔板 3 次，在吸水紙上拍干（拍干后未清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
5 、酶標儀在所有孔中加入 100µl 的酶標二抗，酶標儀用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻， 25 ℃環境中避光反應 30 分鐘。取出酶標板，按步驟 4 洗板 5 次。
6 、洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個微孔中先加入 50µl 底物液 A ，再加 50µl 底物液 B ，輕微晃動反應板使之*混勻， 25 ℃環境避光顯色 15 分鐘 ( 在顏色淺的情況下可適當延長反應時間，但總顯色時間不要超過 30 分鐘 ) 。
7 、每孔中加入 50µl 終止液，輕輕晃動使之*混勻，在 450nm （建議使用雙波長 450/630nm ）下檢測吸光度，結果在 5 分鐘內讀取。
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